Vaginalzytologie (Hund)

Synonym: Exfoliative Vaginalzytologie

Definition

Unter Vaginalzytologie versteht man ein gynäkologisches Diagnoseverfahren bei der Hündin, das im Rahmen der gynäkologischen Untersuchung durchgeführt wird.

Hintergrund

Die Vaginalzytologie ist ein spezielles Untersuchungsverfahren, bei dem nach durchgeführtem Vaginalabstrich eine zytologische Beurteilung der entnommenen Zellen vorgenommen werden kann. Die histologischen Befunde geben Aufschluss über die Zyklussituation.

Physiologie

Die vaginale Tunica mucosa unterliegt bei der Hündin zyklusabhängigen Veränderungen, weshalb das typische Zellbild zur Zyklusbestimmung herangezogen werden kann. Bei der Hündin können vier Phasen im Zyklus unterschieden werden:

Zyklusphase	Information
Proöstrus:	Follikelanbildungsphase Proliferation des Vaginalepithels unter Östrogeneinfluss 12 bis 18 Zellschichten, die zunehmend verhornen gegen Ende sind oberste Zelllagen vollständig verhornt oberste Zellschichten lösen sich aufgrund von Desquamation
Östrus:	bis zur Ovulation erfolgt Verhornung Desquamation im postovulatorischen Östrus am höchsten vollständige Ablösung oberster Zelllagen 6 bis 8 Tage nach Ovulation
Metöstrus:	aufgrund fortgeschrittener Abschilferung vermehrt verhornte Zellen nachweisbar danach Einwanderung polymorphkerniger Granulozyten aus Submukosa stetige Zunahme von neuen und unverhornten Epithelzellen
Anöstrus:	Vaginalepithel reduziert sich auf ursprüngliche 2 bis 3 Zelllagen luminale Zellen sind fest mit Epithel verbunden Zellen lösen sich nur in geringem Ausmaß gegen Ende des Anöstrus beginnende Epithelproliferation

Die Auf- und Abbauvorgänge in den oberflächlichen Schleimhautschichten stehen in enger Verbindung zur Konzentration der reproduktionsrelevanten Hormone, die den Zyklus regulieren. Aus diesem Grund spiegelt der Zustand des Vaginalepithels die spezifische endokrine Lage des jeweiligen Zyklusabschnitts wider.

Indikationen

Die exfoliative Vaginalzytologie wird bei folgenden Indikationen durchgeführt:

Zyklusbestimmung
Eingrenzung des Deck- oder Besamungszeitpunkts
Nachweis einer erfolgten Bedeckung mit Ejakulation
Abklärung des Zyklusstands vor Einleitung einer Therapie
Verdacht einer ovariellen Funktionsstörung
Verdacht auf ovarielles Restgewebe nach unvollständiger Kastration

Instrumente

Sowohl für die Probennahme, als auch für die anschließende zytologische Beurteilung, sind verschiedene Instrumente notwendig:

Röhrenspekulum oder Spreizspekulum (kleine Hunde)
steriler Tupferträger (z.B. Stieltupfer), sterile Dratöhse oder sterile Feinbürste (z.B. "Cyto-Brush")
Objektträger
Färbetechniken (z.B. HE-Färbung, PAP-Färbung)
Lichtmikroskop

Durchführung

Die Hündin steht mit dem Kopf abgeneigt vor dem Untersucher auf einem Tisch. Die Labien werden trocken gesäubert und dann gespreizt. Anschließend kann das Spekulum vorsichtig eingeführt (zuerst nach dorsal, anschließend nach kranial gerichtet). Nach Adspektion kann die Tupferprobe durchgeführt werden.

Die Entnahmestelle für den Abstrich liegt deutlich kranial des Hymenalrings, direkt kaudal der Pseudozervix. Der Tupfer wird vorab mit steriler und isotoner Kochsalzlösung befeuchtet. Der durch das Spekulum eingeführte Tupferträger wird am Vaginaldach und/oder der Vaginalwand unter leichtem Druck von kranial nach kaudal entlang geführt. Proben aus dem Bereich des Vaginalbodens sollten vermieden werden, da die Gefahr einer Kontamination besteht.

Anschließend wird der Tupferträger in 2 bis 3 Bahnen nebeneinander auf dem Objektträger ausgerollt. Mithilfe eines Fixationssprays wird der Abstrich fixiert, dann getrocknet, vorsichtig mit Wasser abgespült und nach erneutem Trocknen gefärbt.

Histologie

Der Vaginalausstrich kann unter dem Lichtmikroskop histologisch befundet werden. Hierbei müssen alle Zellen anhand der Größe und Form begutachtet werden. Abhängig vom Zyklusstand können folgende Zellen vorgefunden werden:

Zelltyp	Information
Basalzellen:	klein (10 bis 15 µm) und rundlich geformt Zellkern ist basal konzentriert und füllt den größten Teil aus der Zytoplasmasaum ist demzufolge schmal
Parabasalzellen:	etwas größer als Basalzellen (15 bis 30 µm) besitzen eine rundlich-ovale Form Zellkern ist zentral gelagert
Intermediärzellen:	etwas größer (25 bis 30 µm) zwei Typen unterscheidbar: tiefe, rundlich bis oval geformt Zellen hohe Zellen mit abgerundeten Ecken Kern-Zytoplasma-Verhältnis verschiebt sich zugunsten Zytoplasma
Superfizialzellen:	Größe variiert stark (40 bis 60 µm) typisch polygonal geformt unterliegen Verhornung (aufgekrämpelte Zellränder) fortschreitende Karyopyknose bzw. Karyorrhexis
Schollenzellen:	ist Endstufe der Verhornung und Desquamation besitzen Ausdehung einer Superfizialzelle sind kernlos (totale Karyorrhexis) zerfallene Kernstrukturen oftmals noch zentral erkennbar Zellplasma erscheint gelegentlich granuliert Zytoplasma teils mit Vakuolen ausgestattet Zellränder sind teilweise faserig

Diagnose

Da der zelltypische Aufbau den hormonellen Einflüssen unterliegt, kann anhand des Zellbilds der Zyklusstand festgemacht werden.

Zyklusphase	Histologie
früher Proöstrus	Intermediär- und Superfizialzellen Erythrozyten vereinzelt Leukozyten
später Proöstrus	Zunahme von Superfizialzellen, die allmählich verhornen
Östrus	verhornte Superfizialzellen (80 bis 90 %)
früher Metöstrus	Schaumzellen (modifizierte Parabasalzellen mit Vakuolen) Metöstruszellen (modifizierte Parabasalzellen mit neutrophilen Granulozyten)
später Metöstrus	vorwiegend unverhornte Superfizial- und Intermediärzellen vereinzelt neutrophile Granulozyten
Anöstrus	vorherrschend Basal- und Parabasalzellen

Literatur

Günzel-Apel A, Bostedt H (Hrsg.). 2016. Reproduktionsmedizin und Neonatologie von Hund und Katze. Mit 250 Abbildungen und 150 Tabellen. Stuttgart: Schattauer GmbH. ISBN: 978-3-7945-2249-1