Bitte logge Dich ein, um diesen Artikel zu bearbeiten.
Bearbeiten

Southern Blot

1 Definition

Unter der Bezeichnung Southern Blot versteht man ein vorwiegend in der Molekularbiologie und Biotechnologie angewendetes Verfahren zur Analyse von DNA-Fragmenten. Diese Methode ermöglicht die Identifikation einer gesuchten DNA-Sequenz innerhalb der Erbsubstanz. Eine weitere Entschlüsselung ist bei diesem Verfahren nicht notwendig.

2 Geschichte

Das Southern-Blot-Verfahren wurde im Jahr 1975 von dem britischen Molekularbiologen Edwin Southern entwickelt. Northern Blot und Western Blot, die später erst entwickelt wurden, wurden aufgrund des Namens von Edwin Southern nach den Himmelsrichtungen benannt.

3 Prinzip

4 Ablauf des Southern Blot

Zunächst wird die zu analysierende DNA isoliert und anschließend mit spezifischen oder unspezifischen Restriktionsenzymen geschnitten. Danach erfolgt die elektrophoretische Auftrennung in einem Gel und der Transfer auf eine Membran. Für den Transfer existieren verschiedene Methoden.

  1. Kapillar-Blot: nutzt die Kapillarkraft, um die DNA mit Hilfe einer Pufferlösung aus dem Gel auf die Membran zu transportieren.
  2. Vakuum-Blot: Die Methode funktioniert prinzipiell wie der Kapilarblot. Der Vorgang wird allerdings durch ein Vakuum beschleunigt.
  3. Elektro-Blot: Hier geschieht der DNA-Transfer durch das Anlegen einer elektrischen Spannung. Die negativ geladene DNA wandert in einer Elektrolytlösung aus dem Gel in Richtung der hinter der Membran gelegenen Anode.

Nach dem Übertragen der DNA auf die Membran kann die Sondierung durch eine zur DNA komplementären RNA- oder DNA-Sonde erfolgen. Wenn die nicht gebundenen Sonden entfernt sind, kann der eigentliche Nachweis erfolgen. Die Nachweismethode unterscheiden sich je nach Art der Sonde voneinander.

5 Quellen

  1. Gagiannis, Biochemie in Frage und Antwort, Urban & Fischer Verlag München, 3. Auflage, Seite 41

Diese Seite wurde zuletzt am 21. März 2021 um 18:08 Uhr bearbeitet.

Um diesen Artikel zu kommentieren, melde Dich bitte an.

Klicke hier, um einen neuen Artikel im DocCheck Flexikon anzulegen.

Artikel wurde erstellt von:

Letzte Autoren des Artikels:

6 Wertungen (3.5 ø)

52.408 Aufrufe

Copyright ©2021 DocCheck Medical Services GmbH | zur mobilen Ansicht wechseln
DocCheck folgen: