Novobiocin-Test

Novobiocin ist ein Aminocumarin-Antibiotikum, das von Streptomyces niveus gebildet wird. Es hemmt die bakterielle DNA-Gyrase (Topoisomerase II), indem es als kompetitiver Inhibitor an die GyrB-Untereinheit bindet und die ATPase-Reaktion blockiert. Dadurch werden die Superspiralisierung der DNA und in der Folge die DNA-Replikation gehemmt.

Novobiocin besitzt ein schmales Wirkspektrum mit vorwiegender Aktivität gegen grampositive Erreger.

Der Test beruht auf der intrinsischen, d.h. angeborenen Novobiocin-Resistenz von Staphylococcus saprophyticus. Sie wird durch eine Veränderung im gyrB-Gen vermittelt. Die übrigen humanpathogenen koagulase-negativen Staphylokokken sind dagegen überwiegend Novobiocin-sensibel, sodass die Resistenzprüfung eine rasche Zuordnung erlaubt.

Der Novobiocin-Test wird als Plättchendiffusionstest durchgeführt:

• Anlegen einer Keimsuspension des Isolats
• Ausstrich auf Müller-Hinton-Agar (alternativ Blutagar)
• Auflegen eines Testplättchens mit 5 µg Novobiocin
• aerobe Inkubation über 16–24 Stunden bei 35–37 °C
• Ausmessen des Hemmhofdurchmessers in Millimetern

Der Durchmesser des Hemmhofs um das Novobiocin-Plättchen entscheidet über die Einordnung:^[1]

• Hemmhof > 16 mm → Novobiocin-sensibel
• Hemmhof ≤ 16 mm → Novobiocin-resistent

Novobiocin-resistente Stämme wie Staphylococcus saprophyticus zeigen typischerweise keinen oder nur einen minimalen Hemmhof, das Wachstum reicht bis an den Plättchenrand heran.

Die Zuordnung der wichtigsten Staphylokokken-Spezies zeigt folgende Tabelle:

Staphylococcus saprophyticus ist ein häufiger Erreger unkomplizierter Harnwegsinfektionen, vor allem bei jungen, sexuell aktiven Frauen. In Urinkulturen stellen koagulase-negative Staphylokokken häufig Kontaminanten der Hautflora dar. Der Novobiocin-Test erlaubt eine schnelle und kostengünstige präsumtive Abgrenzung von Staphylococcus saprophyticus gegenüber diesen Begleitkeimen und besitzt dabei eine hohe Sensitivität und Spezifität.

Der Novobiocin-Test ist nur für Isolate aus dem Urin validiert und aussagekräftig.

Darüber hinaus ist die Novobiocin-Resistenz nicht ausschließlich für Staphylococcus saprophyticus spezifisch. Auch weitere koagulase-negative Staphylokokken wie Staphylococcus cohnii und Staphylococcus xylosus sowie Mammaliicoccus sciuri sind resistent. Eine definitive Speziesidentifikation erfordert daher ggf. ergänzende Verfahren wie die MALDI-TOF-Massenspektrometrie oder molekularbiologische Methoden.