Plattendiffusionstest
Synonyme: Hemmhoftest, Diffusionstest, Diffusionsplattentest
Englisch: disk diffusion test
Definition
Ein Plattendiffusionstest ist ein mikrobiologisches Testverfahren. Es verwendet feste Nährmedien in Form von Agarplatten, auf die wachstumsfördernde oder wachstumshemmende Stoffe aufgebracht werden. Der Plattendiffusionstest ist eine Form des Agardiffusionstests.
Verfahren
Die Agarplatten werden mit Mikroorganismen (z.B. Bakterien) in fein suspendierter Form beimpft. Diese Organismen führen nach Bebrütung der Agarplatte zu einem makroskopisch sichtbaren Bewuchs, der sich als Trübung des Agars bemerkbar macht. Das Wachstum der Mikrorganismen kann durch Aufbringung von wachstumsfördernden oder wachstumshemmenden Stoffen (Testsubstanzen) auf den Agar modifiziert werden.
Einteilung
Die Testsubstanzen können auf verschiedene Weise appliziert werden:
- Blättchentest bzw. Scheibchentest: Auf die Agarplatte werden kleine Filterpapierscheibchen aufgelegt, welche die Testsubstanzen in einer definierten Konzentration enthalten.
- Lochtest: Die Testsubstanz wird in ausgestanzte Löcher auf der Agarplatte eingefüllt.
- Zylindertest: Die Testsubstanz wird in kleine Metallzylinder auf der Oberfläche der Agarplatte pipettiert. Diese Testform setzt man nur noch selten ein.
Beurteilung
Nach der Bebrütung zeigt sich bei wachstumshemmenden Stoffen (z.B. Antibiotika) ein kreisförmiger, klarer Hemmhof, der sich vom trüben Bewuchs der restlichen Agarplatte abhebt. In dieser Zone hat keine Vermehrung der Mikroorganismen stattgefunden.
Bei wachstumsfördernden Stoffen (z.B. Aminosäuren) zeigt sich das umgekehrte Bild, nämlich eine kreisförmige Trübungszone um den Applikationsort, während die restliche Agarplatte klar bleibt.
Anwendung
Der Plattendiffusionstest wird zum Beispiel zur Erstellung eines Antibiogramms verwendet. Durch einen Vergleich des Durchmessers der Hemmhöfe lässt sich auch die minimale Hemmkonzentration (MHK) eines Antibiotikums bestimmen.