Coomassie-Brillant-Blau
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LoslegenSynonym: Coomassie
Englisch: Coomassie-brillant-blue
Definition
Coomassie-Brillant-Blau ist ein Triphenylmethan-Farbstoff, der vor allem zum unspezifischen Anfärben von Proteinen verwendet wird. Er lagert sich an die basischen Seitenketten der Aminosäuren an.
Hintergrund
Coomassie-Brillant-Blau wurde ursprünglich als Wollfarbstoff entwickelt. Der Name stammt von der afrikanischen Stadt Coomassie.
Chemie
Die beiden wichtigsten Farbstoffe dieser Gruppe sind Coomassie-Brillantblau R-250 und Coomassie-Brillantblau G-250. Ihre Färbung hängt vom pH-Wert der Lösung ab.
- Coomassie-Brillant-Blau R-250 hat die Summenformel C45H44N3NaO7S2 und ein Molekulargewicht von 825,97 g/mol. Der Namenszusatz „R“ im Namen Coomassie Brillant Blau ist eine Abkürzung der englischen Bezeichnung „reddish“ (rötlich).
- Coomassie-Brillantblau G-250 hat die Summenformel C47H48N3NaO7S2 und ein Molekulargewicht von 854,02 g/mol. Der Zusatz „G“ steht als Abkürzung für „greenish“ (grünlich).
Die Zahl „250“ in beiden Namen bezieht sich auf die Farbintensität des jeweiligen Farbstoffs.
Anwendungsgebiete
Typischerweise wird Coomassie-Brillant-Blau zum Anfärben von aufgetrennten Proteinen in einem Polyacrylamid-Gel (PAGE) benutzt. Coomassie-Brillantblau G-250 dient darüber hinaus der Quantifizierung des Proteingehaltes wässriger Lösungen nach der Bradford Methode.
Die Nachweisgrenze für Coomassie R-250 liegt bei ca.0,1 µg Protein pro Bande in einem Gel, für Coomassie G-250 bei etwa 0,5 µg. Die Färbung mit Coomassie G-250 ist zudem deutlich schneller.
Literatur
- Bradford. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal Biochem. 72:248-54. 1976