Mikrotom

Die Histologie bedient sich verschiedenster Präparate (z.B. Ausstrichpräparat, Zupfpräparat bzw. Isolationspräparat usw.) um spezielle Untersuchungen an Geweben durchzuführen. Das Schnittpräparat ist eines der häufigsten Präparatarten in der Histologie.

Die Pathologie hingegen verwendet meist spezielle Gefriermikrotome, da die Zeit ein wichtiger Faktor ist und die gewonnenen Präparate möglichst schnell untersucht werden müssen.

Um mit einem Mikrotom ein Schnittpräparat erstellen zu können, müssen einige Schritte vorausgegangen sein. Folglich ein Beispiel eines üblichen Ablaufs in der Histologie:

• schonende Gewebeentnahme
• Fixierung (mit Fixiermittel)
• Einbettung
• aufsteigende Alkoholreihe (Wasserentzug)
• Paraffinbad
• Schneiden mit dem Mikrotom
• Übertragung auf einen Objektträger (mit Eiweiß-Glycerin-Kleber)
• Färbung

Der vorgefertigte Paraffinblock wird in ein Mikrotom eingespannt und mittels Spezialmesser auf die gewünschte Dicke geschnitten. Das Schnittpräparat wird anschließend mit einem befeuchteten Pinsel vom Mikrotommesser abgehoben und auf den Objektträger aufgelegt. Dieser wird vorher mit Wasser befeuchtet (damit sich das Schnittpräparat beim Austrocknen "ausstreckt"), anschließend mit Eiweiß-Glycerin-Kleber bestrichen und dann mit dem Schnittpräparat zusammengefügt. Der Objektträger muss anschließend (vorzugsweise) über Nacht in einem Brutschrank (bei 40°C) austrocknen.

Grundsätzlich besteht ein Mikrotom aus einem Messerblock, wobei die Messer ausgewechselt werden können - und einem Präparathalter, der auf einem "Schlitten" befestigt ist. Hierbei wird der Schlitten in Richtung des Messers gefahren, sodass nach eingestellter Schnittdicke das Präparat geschnitten wird. Je nach Mikrotom und Verfahren unterscheidet man zwischen folgenden Schnittdicken:

• gängige Präparate: 7-19 μm
• semidünne Präparate: 0,5-1 μm
• ultradünne Präparate: 30-100 nm

• Schlittenmikrotom
• Rotationsmikrotom
• Gefriermikrotom