Extinktionskoeffizient

Beim Extinktionskoeffizienten handelt sich um eine intrinsische Stoffeigenschaft. Er ist abhängig von der Wellenlänge, der Temperatur, dem pH-Wert und zum Teil auch vom Lösungsmittel.

Die Abschwächung der elektromagnetischen Wellen basiert auf Streuung und Absorption.

Der Extinktionskoeffizient wird u.a. verwendet, um mithilfe des Lambert-Beer'schen Gesetzes die Konzentration einer Lösung anhand der Absorption von monochromatischem Licht zu berechnen.$${\displaystyle E_{\lambda }={\log }_{10}\left(\frac{I_0}{I_1}\right)={\epsilon }_{\lambda }\times c\times d}$$wobei:

• E = Extinktion
• ${\displaystyle I_0}$ = Intensität des einfallenden (eingestrahlten) Lichtes (Einheit: W${\displaystyle \times }$m⁻²)
• ${\displaystyle I_1}$ = Intensität des transmittierten Lichtes (Einheit: W${\displaystyle \times }$m⁻²)
• ${\displaystyle c}$ = Stoffmengenkonzentration der absorbierenden Substanz in der Flüssigkeit (Einheit: mol ${\displaystyle \times }$m⁻³)
• ${\displaystyle {\epsilon }_{\lambda }}$ = dekadischer Extinktionskoeffizient bei der Wellenlänge ${\displaystyle \lambda }$
• ${\displaystyle d}$ = Schichtdicke des durchstrahlten Körpers, z.B. die Dicke der verwendeten Küvette (Einheit: m)

Bei einer Messung der Nukleinsäuren mit dem Spektralphotometer zeigt ein Absorptionswert (OD) von 1 bei 260 nm ungefähr folgenden Gehalt: 50 µg/mL für doppelsträngige DNA (dsDNA), 40 µg/mL für einzelsträngige RNA/DNA (ssRNA/ssDNA) und 20 µg/mL für Oligonukleotide.