Blotting
Trainier deine Lernmuskeln!
Mit Flash Cards, Quiz und mehr
LoslegenSynonym: Blotten
Definition
Unter Blotting versteht man die Übertragung von DNA, RNA oder Proteinen von einem Elektrophorese-Gel auf eine Zielmembran. Damit können bestimmte Moleküle biochemisch nachgewiesen werden.
Ablauf
Vor dem Blotting werden die Moleküle durch Elektrophorese in einem Gel nach Ladung und Größe getrennt. Anschließend erfolgt der Transfer auf eine Membran (meist aus Nitrocellulose oder Polyvinylidenfluorid), wo die Moleküle irreversibel fixiert werden. Die Übertragung kann mittels Diffusion, Kapillarwirkung oder Elektrophorese erfolgen. Danach erfolgt der Nachweis über markierte Sonden (DNA/RNA) oder spezifische Antikörper (Proteine).
Verfahren
Die gängigsten Verfahren, bei denen Blotting zum Einsatz kommt, sind:
- Southern Blot (DNA)
- Northern Blot (RNA)
- Western Blot (Proteine)
Als Kombinationen existieren darüber hinaus der Southwestern Blot und der Northwestern Blot.