Luciferin-Luciferase-System

• Schritt 1 - Überführung des Luciferins in Luciferinadenylat: Durch Bindung von AMP an die Carboxylatgruppe des Luciferins wird Energie frei (ATP-Verbrauch).
• Schritt 2 - Angeregter Zustand: Das Luciferinadenylat erreicht seinen angeregten Zustand (*).
• Schritt 3 - Rückfall auf den Grundzustand und Reaktion zu Oxyluciferin: Das Luciferinadenylat fällt auf Grundzustand zurück und reagiert unter Abspaltung der Carboxylatgruppe als CO₂ zu Oxyluciferin. Die dabei freiwerdende Energie wird als Licht emittiert.

Resistenzermittlung

Das Luciferin-Luciferase-System kann zur Resistenzbestimmung eingesetzt werden. Dabei wird mit Hilfe von erregerspezfischen Partikeln das Luciferase-Gen in die Bakterien eingeschleust, deren Resistenz getestet werden soll. Nach Zugabe von Luciferin kommt es in der Probe zur Biolumineszenz. Bei gleichzeitiger Zugabe eines Antibiotikums kann die Empfindlichkeit der Erreger indirekt durch die Intensität der Lumineszenz ermittelt werden. Bei Wirksamkeit des Antibiotikums kommt es zu einer abgeschwächten oder ausbleibenden Lichtemission. Das emittierte Licht misst man mithilfe eines Lumineszenzphotometers.

Neugeborenen-Screening

Ein weiteres Einsatzgebiet des Luciferin-Luciferase-Systems ist das Neugeborenenscreening auf eine Duchenne-Muskeldystrophie. Hier macht man sich den Umstand zunutze, dass bei der Luciferin-Luciferase-Reaktion ATP verbraucht wird. Bei einer Muskeldystrophie ist die Creatinkinase (CK) im Blut deutlich erhöht. Diese CK setzt für die Messreaktion zugeführtes Kreatinphosphat und ADP zu ATP und Kreatin um. Das ATP-verbrauchende Luciferin-Luciferase-System dient dann als Indikatorreaktion, deren Biolumineszenz luminometrisch gemessen werden kann. Ist die CK in der Probe erhöht, kommt es zu einer verstärkten Lumineszenz.